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MDA(丙二醛）检测

MDA detection

实验原理

丙二醛（MDA）是常用的膜脂过氧化指标亚博体彩网站-√亚博体彩网站-√，在酸性和高温度条件下亚博体彩网站-√，可以与硫代巴比妥算（TBA）反应生成红棕色的三甲川（3亚博体彩网站-√，5亚博体彩网站-√亚博体彩网站-√，5-三甲基恶唑-2亚博体彩网站-√，4-二酮）亚博体彩网站-√，其最大吸收波长在532nm亚博体彩网站-√亚博体彩网站-√亚博体彩网站-√。但是测定植物组织中MDA时受多种物质的干扰亚博体彩网站-√，其中最主要的是可溶性糖亚博体彩网站-√亚博体彩网站-√，糖与TBA显色反应产物的最大吸收波长在450nm亚博体彩网站-√，但532nm处也有吸收。植物遭受干旱、高温亚博体彩网站-√亚博体彩网站-√、低温等逆境胁迫时可溶性糖增加，因此测定植物组织中MDA-TBA反应物质含量时　一定要排除可溶性糖的干扰。低浓度的铁离子能够显著增加TBA与蔗糖或MDA显色反应在532、450nm处消光度值亚博体彩网站-√亚博体彩网站-√亚博体彩网站-√，所以在蔗糖亚博体彩网站-√亚博体彩网站-√亚博体彩网站-√亚博体彩网站-√、MDA与TBA显色反应中需一定量的铁离子，通常植物组织中铁离子的含量为每克干重100～300u　g．g^-1,根据植物样品量和提取液的体积亚博体彩网站-√，加入Fe^3+的终浓度为0.5u　mol．L^-1亚博体彩网站-√。

试剂

1：质量分数为10%三氯乙酸（TCA）亚博体彩网站-√；

2：质量分数0.6%硫代巴比妥酸：先加少量的氢氧化钠（1mol·L-1）溶解，再用10%的三氯乙酸定容亚博体彩网站-√亚博体彩网站-√；

方法

1：MDA的提取 称取剪碎的试材1g亚博体彩网站-√，加入2mll0%TCA和少量石英砂亚博体彩网站-√，研磨至匀浆亚博体彩网站-√，再加8mlTCA研磨亚博体彩网站-√，匀浆在4000r/min离心10min亚博体彩网站-√亚博体彩网站-√，上清液为样品提取液亚博体彩网站-√亚博体彩网站-√。

2：显色反应和测定 吸取离心的上清液2ml（对照加2ml蒸馏水），加入2ml0.6%TBA溶液亚博体彩网站-√亚博体彩网站-√，混匀物于沸水浴上反应15min亚博体彩网站-√，迅速冷却后再离心亚博体彩网站-√。取上清液测定532亚博体彩网站-√、600和450nm波长下的消光度亚博体彩网站-√。

实验结果展示